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紫外交聯(lián)儀經(jīng)常應用的實(shí)驗

更新時(shí)間:2024-02-27      點(diǎn)擊次數:917
  威尼德紫外交聯(lián)儀:在Northern blotting、Southern blotting、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯(lián)、Sterilization(滅菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的應用。
 
  紫外交聯(lián)技術(shù)是一種常用于材料科學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域的重要技術(shù)手段。隨著(zhù)材料研究的不斷深入,紫外交聯(lián)儀逐漸成為了廣泛應用的分析設備。
 
  紫外交聯(lián)儀利用紫外光對材料進(jìn)行照射,通過(guò)能量的輸入和材料分子之間的相互作用,實(shí)現材料的共價(jià)鍵形成或斷裂。當紫外光照射在材料上時(shí),光能激發(fā)材料內部的電子,使其躍遷到較高的能級。這些激發(fā)態(tài)的電子會(huì )與周?chē)姆肿影l(fā)生相互作用,進(jìn)而導致化學(xué)鍵的形成或斷裂,從而實(shí)現材料的交聯(lián)或解交聯(lián)。
 
  紫外交聯(lián)儀在材料科學(xué)中有廣泛的應用。首先,在涂料和粘合劑領(lǐng)域,可用于評估和控制材料的交聯(lián)程度,從而影響材料的硬度、耐久性和附著(zhù)力。其次,在聚合物材料領(lǐng)域,可用于研究聚合反應的動(dòng)力學(xué)過(guò)程,確定較佳交聯(lián)條件和優(yōu)化聚合物的性能。此外,還可應用于紡織品、電子器件、醫療器械和涂層等領(lǐng)域。
 
  紫外交聯(lián)儀作為一種分析設備,在材料科學(xué)中具有多個(gè)優(yōu)勢。首先,操作簡(jiǎn)單、速度快,可實(shí)時(shí)監測交聯(lián)反應的進(jìn)行,提高研究效率。其次,具有較高的靈敏性和準確性,可以對微小的交聯(lián)變化進(jìn)行檢測和測量。另外,不需要添加化學(xué)試劑,對樣品無(wú)損傷,適用于各種材料的表面和體積分析。
 
  紫外交聯(lián)儀作為一種重要的分析設備,在材料科學(xué)中發(fā)揮了重要作用。它通過(guò)紫外光的照射實(shí)現材料的交聯(lián)或解交聯(lián),應用廣泛。它具有操作簡(jiǎn)單、速度快、靈敏性高等優(yōu)勢,能夠實(shí)時(shí)監測交聯(lián)過(guò)程,并對材料的性能進(jìn)行評估和控制。隨著(zhù)技術(shù)的不斷發(fā)展,它在材料科學(xué)中的應用前景將更加廣闊。
 
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        1.Membrane Blotting(膜印跡)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián),當使用254 nm波長(cháng)、能量為120.0mJ/cm2交聯(lián)時(shí),尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價(jià)鍵穩定。
 
  (1)將一張或兩張用轉移緩沖液(如10×SSC)輕輕潤濕的吸水紙放在VL系列紫外交聯(lián)儀的樣品腔。將尼龍膜放在吸水紙上,使附著(zhù)核酸的一面朝上,使紫外線(xiàn)燈管能夠直接照射核酸。
 
  (2)關(guān)閉VL系列紫外交聯(lián)儀的門(mén)。
 
  (3)按下Run/Pause(運行/暫停)按鍵啟動(dòng),當紫外線(xiàn)燈管亮時(shí),顯示屏將立即開(kāi)始從輸入值開(kāi)始累計。如果在曝光期間的任何點(diǎn)打開(kāi)門(mén),照射將停止,并顯示已曝光值。(關(guān)上門(mén)按Run/Pause按鍵繼續照射。)
 
  (4)輻照完成后,蜂鳴器將鳴響約3–4秒。自動(dòng)交聯(lián)大約需要25–50秒。
 
  (5)取下尼龍膜并關(guān)上門(mén),交聯(lián)完成。每次使用后,清潔紫外線(xiàn)交儀樣品腔,以清除殘留的鹽。
 
  2.DNA Nicking(DNA缺失)
 
  威尼德生物科技(北京)有限公司紫外線(xiàn)交聯(lián)劑也可用于切割溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中的DNA,代替HCl洗滌液,瓊脂糖凝膠中比較大的DNA(>20kb)的轉模效率很低,因此DNA在轉移到尼龍膜之前需要進(jìn)行前處理。DNA可通過(guò)HCl或紫外線(xiàn)照射進(jìn)行切割。HCl脫嘌呤反應較難控制,且對溫度極為敏感。所以在轉移前,在短波長(cháng)紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。
 
  3.Sterilization(滅菌)
 
  紫外線(xiàn)殺菌就是通過(guò)紫外線(xiàn)照射,破壞及改變微生物的DNA(脫氧核糖核酸)結構,使細菌當即死亡或不能繁殖,達到殺菌的目的。真正具有殺菌作用的是UVC紫外線(xiàn),因為C波段紫外線(xiàn)很容易被生物體的DNA吸收,尤其是254nm波長(cháng)左右紫外線(xiàn)最佳。紫外線(xiàn)殺菌屬于純物理消毒方法,具有簡(jiǎn)單便捷、光譜高效、無(wú)二次污染。因此在短波長(cháng)紫外光(254 nm)中滅菌95sec。
 
  4.RecA Screening(RecA篩選)
 
  紫外線(xiàn)交聯(lián)劑也可用于篩選RecA突變體,在短波長(cháng)紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下,recA突變體阻止了紫外線(xiàn)誘導損傷的修復,阻止了紫外照射過(guò)的過(guò)的recA細胞的生長(cháng)。